Identificación de perfiles de receptores de insulina en el pulgón cenizo de la col Brevicoryne brassicae L. (Hemiptera: Aphididae) / Hever Usiel Cruz Méndez

Tesis Maestría en Ciencias en Recursos Naturales y Desarrollo Rural El Colegio de la Frontera Sur 2022

Incluye bibliografía

Resumen.. Capítulo 1. Introducción.. 1.1 Introducción general.. 1.2 Uso de químicos en la agricultura.. 1.3 La horticultura en Los Altos de Chiapas.. 1.4 Principales insectos plagas en el cultivo de repollo.. 1.5 Biología general de Brevicoryne brassicae L. .. 1.6 La insulina y receptores de insulina.. 1.7 Tecnología del ARN de interferencia.. 1.8 Pregunta de investigación.. 1.9 Hipótesis.. 1.10 Objetivos.. 1.11 Metodología.. Capítulo 2. Bioprospección de receptores de insulina a partir de ARN mensajero en Brevicoryne brassicae L. (Hemiptera: Aphididae).. 2.1 Artículo publicado en la revista Acta Zoológica Mexicana.. Introducción.. Materiales y Métodos.. Obtención de especímenes de B. brassicae.. Extracción de ARN total y síntesis de ADN complementario.. Amplificación de InR y purificación de productos de PCR.. Identificación molecular de amplicones de PCR.. Regiones y dominios en InR in silico.. Resultados.. Integridad de ARN total y obtención de ADNc.. Amplificación de InR.. Identificación in silico de InR en Brevicoryne brassicae.. Análisis filogenético de InR.. Discusión.. Información Suplementaria.. Literatura Citada.. Capítulo 3.. 3.1 Discusión general.. 3.2 Conclusión general.. 3.3 Perspectiva.. 3.4 Literatura citada

La técnica del ARNi de interferencia (ARNi) se desarrolló para entender mejor la forma en la que funcionan los genes. En la actualidad la técnica del ARNi se ha propuesto como alternativa para el control de insectos plagas en la agricultura, que consiste en sintetizar ARN de doble cadena (ARNdc) e introducirlo en la célula para bloquear ARN mensajero (ARNm) de proteínas involucradas en el crecimiento y desarrollo de los insectos. Un paso esencial es, la búsqueda de genes codificantes a proteínas blanco para generar un ARNi altamente específico en el insecto de interés. En este estudio a través de ARNm y de cebadores inespecíficos se realizó la bioprospección de genes receptores de insulina (InR) en Brevicoryne brassicae L. (Hemiptera: Aphididae) comúnmente llamado pulgón cenizo de la col, una especie plaga de los cultivos de Brassica oleracea L. y Brassica campestris L. en Los Altos de Chiapas, para el desarrollo posterior de la técnica del ARNi como posible método de control del pulgón. A partir del ácido desoxirribonucleico complementario (ADNc) y mediante PCR anidada se amplificó la región correspondiente a InR con cuatro pares de cebadores diseñados para Nilaparvata lugens (Hemiptera: Delphacidae) y Toxoptera citricida (Hemiptera: Aphididae). Los análisis bioinformáticos no lograron identificar la presencia de proteínas InR, en su lugar se predice la presencia de regiones de proteínas receptoras conocidas como Dip2A con porcentajes altos de identidad y 66.7 % de anclaje en membrana y pared celular. Se sugiere continuar con la búsqueda de InR específicos para el pulgón, así como posibles cebadores para regiones de Dip2A, para explorar la síntesis de ARNi específico en el pulgón y sus efectos en el desarrollo del pulgón. spa

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