Análisis metodológico para la extracción de ADN metagenómico en muestras coprológicas humanas / Ivar Jasiel Torres Romero

Tesis Químico Farmacobiólogo Universidad Autónoma de Chiapas. Escuela de Ciencias Químicas 2018

Bibliografía: hojas 36-38

I. Resumen.. II. Introducción.. III. Marco teórico.. 3.1 Ácidos nucleicos.. 3.2 Métodos de extracción.. 3.3 Pureza de ácidos nucleicos.. 3.4 Análisis moleculares.. IV. Antecedentes metodológicos.. 4.1 Uso de detergentes (CTAB Y SDS.. 4.2 Uso de disolventes orgánicos.. 4.3 Metagenómica.. V. Planteamiento del problema.. VI. Hipótesis.. VII. Justificación.. VIII. objetivo general.. IX. Objetivos específicos.. X. Metodología.. 10.1 Participantes y muestra.. 10.2 Materiales, equipos y reactivos.. 10.3 Extracción de DNA.. 10.4 Cuantificación de DNA.. 10.5 Electroforesis en gel de agarosa.. XI. Resultados.. 11.1 Características generales de los participantes y la muestra.. 11.2 Normalidad de la muestra.. 11.3 Cuantificación de ADN.. 11.4 Pureza de ADN.. 11.5 Electroforesis en gel de agarosa.. XII. discusión.. XIII. Conclusiones.. XIV. Referencias.. Anexo 1.. Cuestionario.. Anexo 2

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En años recientes se han realizado descubrimientos sobre la microbiota intestinal y su relación con enfermedades y síndromes metabólicos en los humanos, además de que regulan algunas funciones fisiológicas como la respuesta inmune y señalización molecular. Estos descubrimientos han sido posibles mediante análisis moleculares de nueva generación como la metagenómica. Para realizar estos estudios se utiliza material genético a partir de la materia fecal humana, que es de recolección no invasiva para el donador. La extracción de ADN se vuelve difícil de realizar debido a la diversidad de material genético contenido en la muestra, por lo que es importante instaurar un método que asegure la extracción de ADN de alto rendimiento para realizar estudios moleculares como el análisis metagenómico. El objetivo de este trabajo fue analizar la metodología de extracción de ADN haciendo un comparativo entre dos tipos de detergentes utilizados en la lisis celular para determinar cuál de los dos demuestra un mejor desempeño en el proceso de extracción. La comparación se hizo con base a la concentración y pureza de ADN obtenido por medio de espectrofotometría y la calidad cualitativa de ADN determinada por electroforesis en gel de agarosa. Los detergentes utilizados fueron CTAB y SDS. Los resultados demostraron que el CTAB es un detergente con mayor rendimiento para la extracción de ADN metagenómico. spa