Etiología de la mancha negra en la orquídea Guarianthe skinneri (Bateman) Dressler y Higgins en el Soconusco, Chiapas / Fabiola Hernández Ramírez

Tesis Maestría en Ciencias en Recursos Naturales y Desarrollo Rural El Colegio de la Frontera Sur 2018

Incluye bibliografía

Resumen.. I. Introducción.. II. Revisión de Literatura.. 2.1 Guarianthe skinneri (Bateman Dressler & Higgins.. 2.2 Generalidades de los hongos.. 2.3 Parasitismo.. 2.4 Diagnóstico de las enfermedades en plantas.. 2.5 Enfermedades que afectan a las orquídeas.. 2.6 Análisis moleculares como herramienta para la identificación de hongos fitopatógenos.. 2.6.1 Reacción en cadena de polimerasa (PCR y secuenciación.. 2.7 Análisis filogenético.. 2.8 Estrategias de conservación.. III. Justificación.. IV. Pregunta de Investigación.. V. Hipótesis.. VI. Objetivos.. 6.1 Objetivo general.. 6.2 Objetivos específicos.. VII. Metodología.. 7.1 Colecta de pseudobulbos infectados.. 7.2 Descripción de los síntomas de la enfermedad.. 7.3 Aislamientos.. 7.4 Pruebas de patogenicidad.. 7.4.1 Preparación de la suspensión de conidios.. 7.4.2 Inoculación de los pseudobulbos.. 7.4.3 Evaluación de las pruebas de patogenicidad.. 7.4.4 Análisis estadístico.. 7.4.5 Microscopía Electrónica de Barrido.. 7.5 Identificación morfológica del agente causal.. 7.5.1 Morfología de estructuras reproductivas.. 7.5.2 Velocidad de crecimiento.. 7.6 Identificación molecular.. 7.6.1 Extracción de ácidos nucleicos totales.. 7.6.2 Electroforesis.. 7.6.3 Amplificación de la región ribosomal ITS: PCR.. 7.6.4 Secuenciación.. 7.6.5 Construcción del árbol filogenético.. Vlll. Resultados.. 8.1 Descripción de los síntomas en los pseudobulbos colectados.. 8.2 Hongos aislados.. 8.3 Frecuencia de aislamientos.. 8.4 Pruebas de patogenicidad.. 8.5 Identificación morfológica del agente causal.. 8.5.1 Velocidad de crecimiento del micelio.. 8.6 Identificación molecular.. 8.6.1 Análisis filogenético del ITS.. lX. Discusión.. 9.1 Hongos asociados a la mancha negra.. 9.2 Evidencia de patogenicidad del agente causal.. 9.3 Desarrollo de la mancha negra en cultivo.. 9.4 Identificación del agente causal

X. Conclusiones.. Xl. Literatura Citada.. Xll. Anexo.. 12.1 Medios de cultivo.. 12.2 Secuencias de nucleótidos de los aislados de Lasiodiplodia spp.. 12.3 Artículo sometido al Journal of Plant Pathology

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La orquídea Guarianthe skinneri, atractiva por sus flores lilas, aún está presente en poblaciones reducidas en remanentes de bosques y selvas. Las poblaciones silvestres son vulnerables por las extracciones de plantas y por la reducción de su hábitat. Como estrategia de conservación se cultiva sustentablemente en comunidades rurales, no obstante, el proceso requiere ser optimizado, porque las plantas son afectadas por enfermedades no diagnosticadas. Por tanto, el objetivo de este estudio fue identificar y caracterizar el agente causal de las manchas de color negro observadas en los pseudobulbos de G. skinneri. Los síntomas observados fueron semejantes a los causados por hongos en otras orquídeas. Por ello, fueron aislados hongos de plantas cultivadas que mostraron una lesión negra que denominamos "mancha negra", los cuales fueron identificados con métodos morfológicos. 18 cepas pertenecientes a cuatro taxones fueron aisladas: Lasiodiplodia sp., Pestalotiopsis sp., Fusarium sp. y Colletotrichum sp. Las cepas de Lasiodiplodia por ser las más frecuentes fueron seleccionadas para análisis posteriores. Los conidios inmaduros de Lasiodiplodia fueron hialinos sin septo y los conidios maduros de color café con un septo. La identidad se confirmó con análisis moleculares, cinco cepas corresponden a Lasiodiplodia theobromae y tres a Lasiodiplodia sp. Las pruebas de patogenicidad se realizaron inoculando los aislados de Lasiodiplodia en pseudobulbos de G. skinneri. Los síntomas observados a las 24 h después de la infección, fueron necrosis en el borde de las heridas, tres días después, inició la producción de exudados y hasta 35 días después de la infección, hubo desprendimiento superficial de la cutícula. Los picnidios crecieron en la superficie de algunos pseudobulbos y otros entre las células del parénquima. Este estudio es una contribución al conocimiento de las enfermedades en la orquídea Guarianthe skinneri, ocasionada por Lasiodiplodia theobromae y Lasiodiplodia sp., agentes causales de la "mancha negra" en pseudobulbos. spa

Manejo y Conservación de Recursos Naturales